Im Dorf sind zahlreiche Strukturen mittelalterlichen Ursprungs vorhanden, insbesondere ein Steinturm mit Rundbogenfenstern. Ancaiano wird erstmals in einem Dokument aus dem Jahre 959 erwähnt. Im dreizehnten Jahrhundert gehörte Ancaiano als kleine Gemeinde zu Siena und ab 1366 zur Gemeinde von Sovicille. Am 15. Januar 1480 wurde hier der bekannte Architekt Baldassare Peruzzi geboren. Im Jahre 1554 versuchte man hier den spanischen Truppen Widerstand zu leisten, leider mussten die Einwohner kapitulieren und viele starben. Papst Alexander VII (Chigi Familie, Besitzerin der nahe gelegenen Villa Cetinale) hat die heutige Kirche, S. Bartolomeo, im Jahre 1660 erbauen lassen (wie laut Anschrift auf dem Portal der Fassade ersichtlich), sie ersetzt die ältere Kirche aus dem dreizehnten Jahrhundert. Die Kirche hat die Form eines lateinischen Kreuzes, ein einziges Kirchenschiff, eine halbrunde Apsis mit vorspringendem Querschiff und dorischem Tonnengewölbe. Wo sich Kirchenschiff und Querschiff treffen, erhebt sich eine halbkugelförmige Kuppel mit Laterne. Die Fassade bietet Stein-Ecksäulen, welche den Sims halten. Steinerne Triglyphen wechseln sich mit Teilen aus Ton wie Metopen ab, auf denen das in der Mitte geöffnete steinerne Tympanum ruht.